DNase I

Aria Biotechnology-DNase I (RNase ve Proteaz İçermeyen) – DNA Yıkımı İçin Yüksek Saflıkta Rekombinant Endonükleaz

Aria Biotechnology-DNase I, hem tek sarmallı hem de çift sarmallı DNA moleküllerini yüksek verimle parçalayan rekombinant bir endonükleaz enzimidir. RNase- ve proteaz içermeyen formülasyonu sayesinde, RNA çalışmaları ve hassas moleküler biyoloji uygulamaları için güvenle kullanılabilir.

✔️ Yüksek spesifiklik: pUC19 plazmid DNA’sının 1 µg’ını 37 °C’de 10 dakikada tamamen sindirir.
✔️ İyon bağımlılığı: Enzim aktivitesi Ca²⁺ gerektirir ve Mg²⁺ iyonlarıyla aktive olur.
✔️ On-column uygulama uyumu: RNA spin kolonlarıyla doğrudan kullanılabilir.
✔️ Isıl inaktivasyon seçeneği: İşlem sonrası 5 mM EDTA ile 65 °C'de 10 dakika inkübasyon önerilir.
✔️ Stabil ve güvenilir: 10X reaksiyon tamponu ve 50 mM EDTA ile birlikte hazır kit olarak sunulur.
✔️ Çeşitli formatlar: 10 mg ve 20 mg toz formun yanı sıra 1 mg/ml hazır çözelti şeklinde sunulur.

🧪 DNase I Kit İçeriği:

• DNase I (1 mg/ml, RNase- ve proteaz içermeyen): 1 ml

• 10X Reaksiyon Tamponu (Mg²⁺ ve Ca²⁺ içeren, Tris-HCl pH 7.5): 1 ml

• 50 mM EDTA: 1 ml

• Kullanım kılavuzu

🧬 Önerilen Reaksiyon Karışımı (in vitro DNA yıkımı için):

İnkübasyon: 37 °C’de 10 dakika
İnaktivasyon (opsiyonel): 10 µl 50 mM EDTA ekleyerek 65 °C’de 10 dakika inkübe edin.

🧪 On-Column DNase I Sindirimi (RNA kitleriyle):

1. Lizat kolon üzerine yüklendikten ve ilk santrifüj adımı tamamlandıktan sonra:

2. 10 µl DNase I + 10 µl 10X tampon + 80 µl nükleaz içermeyen su → toplam 100 µl karışım

3. Bu karışım kolon merkezine uygulanır (membrana dokunmadan)

4. Oda sıcaklığında 15 dakika inkübasyon

5. Ardından 500 µl Wash Buffer I ile yıkama adımı uygulanır

📦 Saklama Koşulları:

• DNase I çözeltisi 4 °C’de saklanmalıdır.

• Uzun süreli stabilite için -20 °C’de bölünmüş şekilde (aliquot) saklanması önerilir.